磷酸化蛋白提取試劑盒

產品簡介

磷酸化蛋白提取試劑盒用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產品組成:

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清至新的管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml；
貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液；在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，
將刮離的細胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細胞：4 oC 400g離心收集細胞，用冷的PBS洗兩次細胞，同樣按細胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復3-4次；
裂解完畢之后，將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡介

上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產分子生物學產品為一體，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心，以產品為保障、以誠信為基礎、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結構清晰，內部管理科學，擁有一支既分工細致又高度合作的年輕化隊伍，保持了各個部門之間的高效合作運轉，充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作，目前已與Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結成緊密的合作伙伴關系，代理其世界的*產品，并在全國各地設有分銷機構。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高品質的產品和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優(yōu)良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務！立足北京，上海，*，隨著產品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進取的敬業(yè)精神，為中國生命科學研究的發(fā)展作出更多的貢獻。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員，歡迎垂詢并期待您的加入！

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